Laboratorio #4
Separación y Cuantificación de Fracciones Proteínicas del Suero
Objetivos:
- Aplicar la técnica de precipiración salina selectiva para separar las diferentes fracciones de proteína presentes en una mezcla.
- Determinar el porcentaje de composición de una mezcla de proteína mediante análisis colorimétrico
Marco Teorico
Al coagularse el fibrinógeno del plasma, obtenemos el suero sanguíneo.
El plasma sanguíneo es el componente líquido de la sangre, es decir, una solución que contiene 90-92 % de agua y transporta sus elementos sólidos (glóbulos y plaquetas). Además, presenta una gran variedad de sustancias en disolución, como azúcares, proteínas, grasas, sales minerales, etc. que se pueden agrupar en tres categorías:
Una de estas categorias son las:
Proteínas: Son albúminas, globulinas y fibrinógeno. El fibrinógeno es el responsable de la formación de coágulos, y la parte de plasma que no lo contiene se denomina suero sanguíneo.
El plasma sanguíneo cuando se coagula la sangre, origina el suero sanguíneo.Suero sanguíneo: al liquido resultante tras la coagulación de la sangre. Se define como la parte liquida del plasma sanguíneo.
El plasma sanguíneo es el componente líquido de la sangre, es decir, una solución que contiene 90-92 % de agua y transporta sus elementos sólidos (glóbulos y plaquetas). Además, presenta una gran variedad de sustancias en disolución, como azúcares, proteínas, grasas, sales minerales, etc. que se pueden agrupar en tres categorías:
Una de estas categorias son las:
Proteínas: Son albúminas, globulinas y fibrinógeno. El fibrinógeno es el responsable de la formación de coágulos, y la parte de plasma que no lo contiene se denomina suero sanguíneo.
El plasma sanguíneo cuando se coagula la sangre, origina el suero sanguíneo.Suero sanguíneo: al liquido resultante tras la coagulación de la sangre. Se define como la parte liquida del plasma sanguíneo.
Si pones en un tubo de ensayo un poco de sangre, después de 10 o 15 minutos se espesa hasta formar una masa pastosa y homogénea, el coágulo. Posteriormente, el coágulose contrae y se separa de un líquido amarillento y transparente, el suero sanguíneo.
El suero se diferencia del plasma en que no contiene fibrinógeno. Esta es una proteína del plasma que, durante el proceso de coagulación, se transforma en fibrina gracias a la acción conjunta de la protrombina, una sustancia fabricada en el hígado, y de la tromboplastina, presente en las plaquetas.
El coágulo es, por tanto, una red de fibrina en la cual quedan aprisionados los glóbulos de la sangre y que actúa a modo de tapón en las heridas
Materiales
Reactivos
Diseño Experimental
Determinación de las Proteínas Totales:
Separación y Determinación de las fracciones de proteínas:
Decante el sobrenadante y adicione en tubos de ensayo las siguientes cantidades:
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